现存有许多种丙型肝炎的检测方式，其中包含了丙型肝炎酶联免疫吸附试验、西方墨点法及及可量化的丙型肝炎RNA聚合酶连锁反应。在感染丙型肝炎后一至两周，其病毒RNA通常即可被侦测；但抗体则需要花较长的时间形成而被测得。
丙型肝炎病毒感染后，藉侦测RNA表现，若丙型肝炎病毒存在持续六个月以上即被定义为慢性丙型肝炎。慢性丙型肝炎在感染初期的数十年间通常没有征兆，通常丙型肝炎的高风险患者会借由定期的肝功能测试中测得提升的肝脏酵素量而发现罹患此疾病。然而，此测试无法区别肝炎是为急性抑是慢性感染。此外，由于母体提供的抗体可作用长达十八个月，因此造成婴儿的丙型肝炎诊断上较为困难。
丙型肝炎的检测首先通常以血液检查，使用酵素免疫分析来检测丙型肝炎抗体表现若检查结果为阳性，进一步的检测则会进行丙型肝炎病毒载量的检验。重组免疫墨点分析则用于验证酵素免疫分析结果、病毒载量则借由RNA聚合酶连锁反应测量。若检测结果不具丙型肝炎病毒RNA、免疫墨点分析结果为阳性，代表受试者曾经感染过丙型肝炎，但病毒借由治疗或自身免疫系统作用而痊愈。
若免疫墨点分析结果为阴性，则代表酵素免疫分析结果为误，原因是因为在丙型肝炎感染6-8周后，酵素免疫分析结果才会呈阳性。有许多其他丙型肝炎的测试，如床边检测，可在三十分钟内提供检测结果。肝脏的酵素在感染初期会有多种变化情形，平均来说在感染七周后肝脏酵素的值会提升。而肝脏酵素的提升量与丙型肝炎的严重性并没有紧密相关。