本文原载于《中华临床感染病杂志》年第6期
乙型肝炎病*(HepatitisBvirus，HBV)感染所致肝炎是世界范围内最常见的肝病之一，HBV感染后逐步发生肝纤维化，可进一步进展至肝硬化、肝衰竭甚至肝癌，严重威胁患者的健康[1]。既往主要依靠肝组织病理学检查评价慢性乙型肝炎(ChronichepatitisB，CHB)患者的肝纤维化程度，但因肝活检创伤较大，不便多次重复检查，临床应用有一定局限性[2]。近年来，越来越多的学者致力于CHB患者肝脏病理学状态的生物学标志物研究，其对肝纤维化的早期诊断与治疗效果评估具有指导意义[3]。凝血酶激活纤溶抑制物(Thrombin-activatablefibrinolysisinhibitor，TAFI)是由羧肽酶B2(CarboxypeptidaseB2，CPB2)基因编码的具有血浆羧肽酶样活性的单链糖蛋白，由肝脏分泌，可抑制纤溶系统的激活[4]。既往研究报道，TAFI缺乏与肝细胞损伤、肝硬化有关[5,6]。本研究分析了不同肝纤维化程度的CHB患者的临床特征与血清TAFI水平，旨在探讨TAFI与乙型肝炎肝纤维化的关系，以及其对肝纤维化程度的预测和评估价值。
1 对象与方法
1.1 研究对象
选取年6月至年3医院感染病科就诊并行肝脏穿刺活检的CHB患者46例。其中男性31例，女性15例，年龄(37.4±9.3)岁。CHB的诊断符合我国《慢性乙型肝炎防治指南(年版)》的诊断标准，即HBsAg和HBeAg阳性、HBVDNA≥拷贝/mL，或HBsAg阳性、HBeAg阴性、HBVDNA≥拷贝/mL[7]。入选标准：(1)年龄18～60岁；(2)未接受治疗的CHB患者；(3)影像学检查无肝硬化及肝癌；(4)患者的临床资料和实验室检查均在肝穿刺前3d内采集，且人口统计学、血常规、生化等资料齐全。排除标准：人类免疫缺陷病*或合并其他慢性病*性肝炎感染者；合并酒精性肝病者；代谢性或其他类型的肝损害者；肝穿刺前半年内已接受过核苷(酸)类药物或干扰素抗病*治疗者；有脾切除手术史者；存在肝穿刺活检术的禁忌证者；肝脏病理检查不符合标准者。所有患者按照年修订的《病*性肝炎防治方案》中的病理组织学诊断标准和Scheuer’s评分标准判定肝脏纤维化分期(S0～S4)[8]，分为轻度肝纤维化组(S0～1，16例)、显著肝纤维化组(S2，15例)及重度肝纤维化组(S3～4，15例)。医院体检中心随机选取16名健康体检者作为健康对照组，其中男性11名，女性5名，年龄(33.0±5.5)岁。本医院伦理委员会审核批准(伦理批号：KY)，且所有患者均签署知情同意书。
1.2 研究方法
所有CHB患者均进行肝脏组织病理学检查。采用MAX-CORE一次性肝活检针(Bardperipheralvascular,Inc.Mexico,USA)，在超声引导下行肝穿刺活检，取得长约1.5cm肝组织，以10%甲醛固定，由病理科进行常规石蜡包埋、切片、HE及Masson′s染色。病理医师独立阅片。常规指标检测包括肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、谷氨酰转肽酶(GGT)以及血常规指标白细胞(WBC)、血小板(Platelets,PLT)、血红蛋白(Hemoglobin,Hb)。血常规的测定采用Sysmex血细胞分析仪；肝功能的检测采用日立全自动生化分析仪，试剂由日本和光公司提供。采集研究对象的空腹血清，保存于－80℃。通过酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)，采用中国武汉的CarboxypeptidaseB2(HM,BIOSWAMP)试剂盒检测血清TAFI水平。APRI评分＝(ALT×)/(PLT×40)；FIB-4指数＝(年龄×ALT)/(PLT×ALT1/2)[9]。
1.3 统计学方法
采用SPSS23.0软件对数据进行分析。计量资料采用±s表示，多组样本间数值变量的比较采用单因素方差分析(One-wayanalysisofvariance,ANOVA)，两组样本间数值变量的比较采用独立样本t检验。计数资料采用例(百分数)表示，采用χ2检验。绘制受试者工作曲线(ROC)分析TAFI、APRI、FIB4等指标对S≥2的诊断效能。以P0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 一般情况分析
各组在年龄、性别、AKP、PLT、WBC、Hb及HBVDNA方面比较，差异均无统计学意义(P0.05)。重度肝纤维化组患者的ALT、AST和GGT水平均高于健康对照组(t＝－4.、－4.和－3.，P值均0.01)。与轻度肝纤维化组相比，显著肝纤维化患者肝功能及血常规差异无统计学意义，而重度肝纤维化组患者AST和GGT水平均相对更高(t＝－3.和－2.，P值均0.01)。重度肝纤维化患者的ALT和GGT水平高于显著肝纤维化患者(t＝－2.和－3.，P值均0.01)。见表1。
2.2 各组患者血清TAFI水平情况比较
轻度肝纤维化组、显著肝纤维化组、重度肝纤维化组患者和健康对照组的血清TAFI水平分别为(63.4±18.2)、(43.8±20.4)、(27.5±19.2)和(71.3±25.6)ng/mL，四组比较差异具有统计学意义(F＝13.，P0.01)。其中显著肝纤维化组的TAFI水平低于健康对照组和轻度肝纤维化组(t＝3.和2.，P0.01)。重度纤维化组TAFI水平低于显著肝纤维化组，差异具有统计学意义(t＝2.，P0.05)，见图1。
2.3 血清TAFI水平与肝纤维化分期的相关性分析
血清TAFI水平与肝纤维化分期呈负相关，即肝纤维化程度越重，血清TAFI水平越低(r＝－0.,P0.01)，见图2。
2.4 血清TAFI水平预测肝纤维化程度的诊断价值
以显著肝纤维化与重度肝纤维化(S≥2)为诊断指标，建立TAFI与其他各指标预测肝纤维化程度的ROC曲线(图3)。结果显示TAFI的曲线下面积(AUC)为0.，以47.0ng/mL为截断值，其诊断S≥2的敏感度和特异度分别为81.3%和78.3%。APRI和FIB-4指数的曲线下面积分别为0.和0.。各指标对肝纤维化(S≥2)均具有较好的预测价值，但各指标相比，差异无统计学意义(P0.05)，见表2。
3 讨论
HBV复制导致了肝细胞的炎性坏死及肝纤维化，是疾病进展的主要病理学基础[10]。肝纤维化时沉积的胶原最初出现在汇管区周围，逐渐形成连接不同肝小叶的纤维间隔，影响肝脏的血流和肝细胞灌注。随着纤维化的进展，肝脏逐渐被分割成由纤维包绕的结节，最终形成肝硬化。年我国《慢性乙型肝炎防治指南》指出[7]，干扰素或核苷类药物抗病*治疗可以使肝纤维化得到改善和逆转，并推荐肝组织学显示炎症坏死≥G2，或纤维化≥S2的患者进行抗病*治疗。因此，对CHB患者肝纤维化的早期诊断和及时治疗具有重要的临床意义。
肝穿刺活检是评估肝脏炎症、坏死和纤维化程度的"金标准"。但作为一种有创检查，其存在出血、感染等潜在并发症，以及可能的取样误差、无法重复多次取材进行动态观察等不足，使其临床应用受到限制[2]。而现有的肝纤维化无创诊断技术仍然存在自身方法或模型的缺陷，无法对CHB显著肝纤维化及以上病变(S≥2)作出准确的判断，以指导患者早期的抗病*治疗。
TAFI是近年来新发现的由肝脏合成的羧肽酶样活性蛋白，在血液循环中以无活性的酶原形式存在[11]。在体内，TAFI可被凝血酶、凝血酶-凝血酶调节蛋白、纤溶酶、胰蛋白酶激活，发挥抗纤溶作用，在凝血和纤溶的动态平衡的精细调节中起到了重要的桥梁作用。有文献报道，TAFI缺乏与肝细胞损伤、肝硬化相关[5,6]。研究发现在丙型病*性肝炎中，TAFI的表达受到抑制[12]。
本研究通过比较健康对照与CHB不同程度肝纤维化患者的临床特点、血清学指标及血清TAFI浓度，发现ALT、AST、GGT及TAFI水平在不同程度肝纤维化中存在一定差异。轻度肝纤维化、显著肝纤维化和重度肝纤维化患者的血清TAFI浓度逐步下降，三组间比较均有统计学意义。研究结果提示，TAFI对CHB患者肝纤维化程度的判断相比于常规的肝酶、PLT等指标具有更大的优势。指南推荐对显著肝纤维化以及更为严重病变程度的CHB患者(S≥2)需要进行抗病*治疗，因此这类患者(S≥2)的早期鉴定和无创诊断格外地重要。血清TAFI水平诊断CHB显著肝纤维化与重度肝纤维化(S≥2)的ROC曲线下面积为0.(P0.01)，APRI的曲线下面积为0.(P0.05)，FIB4的曲线下面积为0.(P0.01)。以血清TAFI水平47.0ng/mL为截断值，其诊断S≥2的敏感度和特异度分别为81.3%和78.3%，提示TAFI对S≥2具有较好的诊断价值。在临床实际工作中，各指标均为无创检测指标，患者易于接受。APRI和FIB4利用常规的年龄、血常规及生化指标即可计算而得，而血清TAFI水平可利用定量检测试剂盒进行检测，前者更加经济，后者更加便捷。
本研究首次发现TAFI在CHB不同程度肝纤维化患者中的差异表达，并发现其可作为预测S≥2的无创诊断标志物，具有较高的诊断价值。基于上述发现，后续有必要通过大样本的临床研究，进一步证实TAFI在乙型肝炎肝纤维化无创诊断中的价值，同时进行机制与通路研究，为CHB肝纤维化的治疗提供新的思路与靶点。
综上所述，肝纤维化患者的血清TAFI水平低于健康者，且肝纤维化程度越重，TAFI水平越低。TAFI表达水平对CHB显著肝纤维化与重度肝纤维化(S≥2)具有较高的诊断价值。
利益冲突 无
参考文献
预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇
